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所属分类：大学试题题库
【◆参考答案◆】：A
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(2)【◆题库问题◆】：[单选] 利用放射性核素标志物质能使照相乳胶感光的原理来探测细胞内某种物质的含量与分布的方法是（）
A．放射自显影技术
B．免疫荧光显微镜技术
C．免疫电镜技术
D．液相杂交技术
E．原位杂交技术
A．放射自显影技术
B．免疫荧光显微镜技术
C．免疫电镜技术
D．液相杂交技术
E．原位杂交技术
【◆参考答案◆】：A
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(3)【◆题库问题◆】：[名词解释] cell-free system（非细胞体系）
【◆参考答案◆】：来源于细胞，而不具有完整的细胞结构，但包含了进行正常生物学反应所需的物质（如供能系统和酶反应体系等）组成的体系即为非细胞体系。近年来，人们利用这一体系探讨了许多细胞生命活动中的重要问题，如细胞周期调控、核膜及染色质的组装、核质运输机制等。
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(4)【◆题库问题◆】：[问答题] 简述细胞生物学的主要研究方法？
【◆参考答案◆】：
代表细胞生物学传统和发展方向的研究方法，可以分为四大方面。
（1）显微技术，这是进行细胞形态结构观察的方法，包括光学显微术、电子显微术和扫描隧道显微术等，目前的分辨本领已达到0.1nm的水平，可以直接观察到DNA．RNA和蛋白质等生物大分子及生物膜、病毒等结构。
（2）细胞组分的分析与原为检测技术，这类方法可对亚细胞结构和生物大分子进行分离和纯化，并可在细胞的原位上检测亚细胞结构和某些大分子的存在状况；
（3）细胞培养和细胞工程技术，这是当前细胞生物学乃至整个生命科学研究和生物工程中重要的实验技术，具有广泛的、重要的理论意义和实践价值；
（4）分子生物学技术，如核酸和蛋白成分的分析和序列测定；核酸的杂交、PCR、基因的克隆与表达以及基因的剔除、RNA干扰技术等，这些都是当今细胞生物学研究中常常使用的实验方法。而且一些物理、化学和信息处理技术也正在被用于细胞生物学的研究。现代细胞生物学的方法及其多样和处于不断的发展当中。
代表细胞生物学传统和发展方向的研究方法，可以分为四大方面。
（1）显微技术，这是进行细胞形态结构观察的方法，包括光学显微术、电子显微术和扫描隧道显微术等，目前的分辨本领已达到0.1nm的水平，可以直接观察到DNA．RNA和蛋白质等生物大分子及生物膜、病毒等结构。
（2）细胞组分的分析与原为检测技术，这类方法可对亚细胞结构和生物大分子进行分离和纯化，并可在细胞的原位上检测亚细胞结构和某些大分子的存在状况；
（3）细胞培养和细胞工程技术，这是当前细胞生物学乃至整个生命科学研究和生物工程中重要的实验技术，具有广泛的、重要的理论意义和实践价值；
（4）分子生物学技术，如核酸和蛋白成分的分析和序列测定；核酸的杂交、PCR、基因的克隆与表达以及基因的剔除、RNA干扰技术等，这些都是当今细胞生物学研究中常常使用的实验方法。而且一些物理、化学和信息处理技术也正在被用于细胞生物学的研究。现代细胞生物学的方法及其多样和处于不断的发展当中。
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(5)【◆题库问题◆】：[名词解释] radio immuno precipitation assay;RIPA;radioimmunoprecipitation（放射免疫沉淀）
【◆参考答案◆】：以放射性标记的抗原或抗体进行的免疫沉淀法。能大大提高检测抗原抗体复合体的灵敏度。
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(6)【◆题库问题◆】：[问答题] 简述动物转基因技术的过程。
【◆参考答案◆】：
转基因动物技术是一项复杂而且涉及内容广泛的技术，其制作过程如下：
（1）克隆目的基因；
（2）给目的基因接上适当的启动子元件；
（3）外源基因的导入，即利用显微操作或其他方法将外源基因注射到动物早期胚胎中，再把胚胎植入动物子宫内；
（4）外源基因整合与表达的检测。转入基因一般是随机整合到宿主动物基因组，但并非所有的外源基因都能整合到动物基因组，而整合的基因也并非都能表达。因此需要对转基因动物进行严格的检测和筛选。在转基因动物制作中，基因转移是影响外源基因整合效率的关键步骤，也是技术难度最大的步骤。
转基因动物技术是一项复杂而且涉及内容广泛的技术，其制作过程如下：
（1）克隆目的基因；
（2）给目的基因接上适当的启动子元件；
（3）外源基因的导入，即利用显微操作或其他方法将外源基因注射到动物早期胚胎中，再把胚胎植入动物子宫内；
（4）外源基因整合与表达的检测。转入基因一般是随机整合到宿主动物基因组，但并非所有的外源基因都能整合到动物基因组，而整合的基因也并非都能表达。因此需要对转基因动物进行严格的检测和筛选。在转基因动物制作中，基因转移是影响外源基因整合效率的关键步骤，也是技术难度最大的步骤。
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(7)【◆题库问题◆】：[名词解释] atomic force microscope ；AFM（原子力显微镜）
【◆参考答案◆】：一种可用来研究包括绝缘体在内的固体材料表面结构的分析仪器。它通过检测待测样品表面和一个微型力敏感元件之间的极微弱的原子间相互作用力来研究物质的表面结构及性质。将一对微弱力极端敏感的微悬臂一端固定，另一端的微小针尖接近样品，这时它将与其相互作用，作用力将使得微悬臂发生形变或运动状态发生变化。扫描样品时，利用传感器检测这些变化，就可获得作用力分布信息，从而以纳米级分辨率获得表面结构信息。根据扫描隧道显微镜的原理设计的高速拍摄三维图像的显微镜。可观察大分子在体内的活动变化。
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(8)【◆题库问题◆】：[名词解释] 冰冻蚀刻
【◆参考答案◆】：
电子显微镜技术：是为配合透射电镜观察而设计的一种标本制作技术。其原理及过程是用快速低温冷冻法将样品迅速冷冻，然后在低温下进行断裂。这时，样品往往从其结构相对脆弱的部位（膜脂双分子层的疏水端）断裂，从而显示出镶嵌在膜脂中蛋白质颗粒。由于冰在真空中少量升华，可进一步增强浮雕式的蚀刻效果。用铂、金等金属进行倾斜喷镀，以形成对应于凹凸的电子反差，在经碳垂直于断面进行真空喷镀形成一个连续的碳膜，然后，用消化液把赝品本身消化掉，将剩下的碳膜及其构成图形的金属微粒移到载网上用电镜进行观察。冰冻蚀刻技术主要用于观察膜断裂面的蛋白质颗粒和膜表面结构，图形富有立体感，样品不需包埋甚至也不需固定，同时能更好地保持样品的真实结构。它是研究生物膜内部结构的一种有用技术。
电子显微镜技术：是为配合透射电镜观察而设计的一种标本制作技术。其原理及过程是用快速低温冷冻法将样品迅速冷冻，然后在低温下进行断裂。这时，样品往往从其结构相对脆弱的部位（膜脂双分子层的疏水端）断裂，从而显示出镶嵌在膜脂中蛋白质颗粒。由于冰在真空中少量升华，可进一步增强浮雕式的蚀刻效果。用铂、金等金属进行倾斜喷镀，以形成对应于凹凸的电子反差，在经碳垂直于断面进行真空喷镀形成一个连续的碳膜，然后，用消化液把赝品本身消化掉，将剩下的碳膜及其构成图形的金属微粒移到载网上用电镜进行观察。冰冻蚀刻技术主要用于观察膜断裂面的蛋白质颗粒和膜表面结构，图形富有立体感，样品不需包埋甚至也不需固定，同时能更好地保持样品的真实结构。它是研究生物膜内部结构的一种有用技术。
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(9)【◆题库问题◆】：[名词解释] ultramicrotomy （超薄切片技术）
【◆参考答案◆】：电子书穿透力很弱，须将标本制成40~50nm的超薄切片。方法与步骤：固定；脱水；包埋；切片；染色。
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(10)【◆题库问题◆】：[问答题,简答题] 为什么说细胞培养是细胞生物学研究的最基本的技术之一？
【◆参考答案◆】：细胞培养的理论依据是细胞全能性，是生命科学的研究基础，是细胞工程乃至基因工程的应用基础。植物细胞的培养为植物育种开辟了一条崭新的途径；动物细胞培养为疫苗的生产、药物的研制与肿瘤防治提供全新的手段；特别是干细胞的培养与定向分化的技术的发展，有可能在体外构建组织甚至器官，由此建立组织工程，同时在细胞治疗及其基因治疗相结合的应用中显示出诱人的前景。
