在进行细胞组分的分离时,实验方案设计的一般原则是什么?

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(1)【◆题库问题◆】:[问答题] 在进行细胞组分的分离时,实验方案设计的一般原则是什么?

【◆参考答案◆】:
根据不同的细胞器或分子具有不同的体积与密度,通过离心力场的作用加以分离。根据这两个主要因素可设计不同的离心方法:速度离心、等密度离心等。

(2)【◆题库问题◆】:[名词解释] finite cell line (有限细胞系)

【◆参考答案◆】:在体外的生存期有限即不能长期传代的细胞系。

(3)【◆题库问题◆】:[名词解释] cell strain(细胞株)细胞株:

【◆参考答案◆】:在体外一般可以顺利地传40—50代,并且仍能保持原来二倍体数量及接触抑制行为的传代细胞。

(4)【◆题库问题◆】:[名词解释] 细胞株

【◆参考答案◆】:
原代培养的细胞一般传至10代左右就不易传下去了,细胞生长出现停滞,大部分细胞衰老死亡,但有极少数细胞可渡过危机而存活下去。这些存活的细胞一般可顺利地传40~50代次,并且仍然保持原来染色体的二倍体数量及接触抑制的行为。很多学者把这种传代细胞称为细胞株。一般情况下,当细胞株传至50代后又要出现危机,不能再传下去。但如有部分细胞发生了遗传突变,产生癌细胞的特点,有可能在培养条件下无限制地传下去,这种传代细胞称为细胞系。细胞系细胞的根本特点是染色体明显改变,一般呈现亚二倍体或非整倍体,失去接触抑制的细胞容易传代培养。

(5)【◆题库问题◆】:[问答题] 从光源、透镜、成像和分辨力四方面比较电镜和光镜。

【◆参考答案◆】:
电镜和光镜从光源、透镜、成像和分辨力四方面不同。
(1)光源的不同:光学显微镜利用可见光作为光源,照明部分包括反光镜、聚光镜和光阑,可对入射光线进行集光并调节其强弱。电镜是以电子束代替光源,以一根钨丝作为阴极发射电子,电子受到阳极吸引而加快速度,加速的电子通过阳极的微孔形成电子束,构成照明源。
(2)透镜的不同:光学显微镜的透镜由物镜、目镜组成,每种镜头由2~3个玻璃透镜构成,由于可见光能在空气中直线前进,所以玻璃透镜可直接在空气中工作。电子显微镜使用产生轴对称磁场的精密线圈作为电磁透镜,以电磁场透镜代替玻璃透镜,但因为电子撞击空气分子将发生散射而不能直线前进,所以,镜筒中的空气必须抽出,保持高度真空。
(3)成像的不同:光学显微镜是通过物镜和目镜的—组玻璃透镜将标本上的微小物体放大成像。在电子显微镜下,标本通过一个气闸送入真空镜筒,经聚光镜汇聚的平行电子束被物镜、中间镜和投影镜多级放大,最后在荧光屏上成像即时观察,或投射到照相底片上成像使底片感光作为永久记录。
(4)分辨力不同:光学显微镜分辨力可达200nm(油镜),电子显微镜分辨力为0.1nm。

(6)【◆题库问题◆】:[单选] 关于扫描电子显微镜,下列哪项有误()
A.20世纪60年代才正式问世
B.景深长,成像具有强烈立体感
C.电子扫描标本使之产生二次电子,经收集放大后成像
D.适于观察细胞的内部构造
E.分辨力为3nm左右

【◆参考答案◆】:D

(7)【◆题库问题◆】:[单选] 光学显微镜能够分辨出其详细结构的有()
A.细胞
B.线粒体
C.核仁
D.叶绿体
E.包被小泡

【◆参考答案◆】:A

(8)【◆题库问题◆】:[名词解释] immunoblotting (免疫印迹)

【◆参考答案◆】:又称蛋白质印迹(Westernblotting),是根据抗原抗体的特异性结合检测复杂样品中的某种蛋白的方法。该法是在凝胶电泳和固相免疫测定技术基础上发展起来的一种新的免疫生化技术。

(9)【◆题库问题◆】:[单选] 细胞原代培养实验中,首先应注意的问题是()
A.无菌操作
B.细胞消化时间
C.添加培养液的量
D.培养液的浓度

【◆参考答案◆】:A

(10)【◆题库问题◆】:[单选] 当体外培养的细胞增殖到一定密度后以1︰2以上的比例转移到几个容器中进行再培养称为()
A.细胞培养
B.原代培养
C.传代培养
D.细胞克隆
E.细胞融合

【◆参考答案◆】:C

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