什么是定位突变,常用的定位突变方法及其原理。

  • A+
所属分类:输气工考试题库
(1)【◆题库问题◆】:[问答题] 什么是定位突变常用的定位突变方法及其原理

【◆参考答案◆】:
(1)定位突变:定位突变是在已知蛋白质结构与功能的基础上,在已知DNA序列中取代、插入或删除选定的核苷酸,从而产生具有新性状的突变蛋白质分子的一种蛋白质工程技术。
(2)
①寡核苷酸引物介导的定位突变:用含有突变碱基的寡核苷酸片段作引物,在聚合酶的作用下启动DNA分子进行复制。包括:Kunkel突变法、基于抗生素的"抗性恢复"突变法、基于去除特定限制酶切点的突变法
②PCR介导的定位突变法:利用PCR将插入和缺失的突变碱基均设计在引物中,先用两对引物分别对核酸进行PCR扩增,通过重叠延伸产生带有部分重叠序列的两种PCR产物,这些产物经过混合、变性、复性和链延伸后,再用一对与两个待接片段外侧互补的引物进行第二次扩增,从而产生全长的异源杂合双链DNA。
③盒式突变:又称片段取代法,利用目标基因序列中适当限制酶切位点,插入各种合适的突变DNA片段,用以取代目标基因中特定DNA片段。包括盒式取代诱变和混合寡核苷酸诱变两种方式。

(2)【◆题库问题◆】:[名词解释] 翻译

【◆参考答案◆】:
以mRNA为直接模板,tRNA为氨基酸运载体,核蛋白体为装配场所,共同协调完成蛋白质生物合成的过程。(补充:在翻译过程中mRNA上的每三个密码子对应三个tRNA上的反密码子,且这三个反密码子只对应一个氨基酸,但是一个氨基酸可有多组密码子来表示。)

(3)【◆题库问题◆】:[名词解释] 终止子

【◆参考答案◆】:
是指一段终止RNA聚合酶转录的DNA序列,分为本征终止子和依赖终止信号的终止子。

(4)【◆题库问题◆】:[问答题,简答题] 在加热过程中,肉的颜色和蛋白质有何变化?

【◆参考答案◆】:(1)肉经加热后,则有多量的液汁分离,体积缩小,构成肌纤维的蛋白质因加热变性发生凝固而引起的。(2)由于加热,肉的持水性降低,降低幅度随加热温度而不同。pH也因加热而变化,随着加热温度的上升,pH也在上升。(3)碱性基的数量几乎没有什么变化,但酸性基大约减少2/3。(4)肉变得柔嫩

(5)【◆题库问题◆】:[问答题,简答题] 微生物的共同特点有哪些?

【◆参考答案◆】:体积微小,结构简单繁殖快,易培养种类多,分布广适应性强,易变异观察和研究手段特殊

(6)【◆题库问题◆】:[多选] 菌种保藏方法主要有()两种。
A.冷冻保藏
B.冻干保藏
C.水浸没保藏
D.单代保藏

【◆参考答案◆】:A, B

(7)【◆题库问题◆】:[名词解释] 食品生物技术

【◆参考答案◆】:是生物技术在食品原料生产加工和制造中的应用的一个学科.

(8)【◆题库问题◆】:[判断题] 固体发酵法生产酶的特点是设备简单,便于推广,但培养基利用不完全,劳动量大.
A.正确
B.错误

【◆参考答案◆】:正确

(9)【◆题库问题◆】:[单选] 在果脯蜜饯加工中,由于划皮太深,划纹相互交错,成熟度太高等,煮制后易产生()现象。
A.返砂
B.流汤
C.煮烂
D.皱缩

【◆参考答案◆】:C

(10)【◆题库问题◆】:[问答题] 酶分子修饰的主要方法有哪些?

【◆参考答案◆】:
(1)化学修饰:利用化学手段将某些化学物质或基团结合到酶分子上,或将酶分子的某些部分删除或置换,改变酶的理化性质,最终达到改变酶催化性质的目的。
①大分子结合修饰;
②肽链有限水解修饰;
③侧链基团修饰;
④分子内或分子间交联:使用双功能试剂交联,更稳定;
⑤氨基酸置换修饰:改变活力中心的氨基酸;
⑥金属离子置换修饰:如将酰基化氨基酸水解酶的活力中心的Zn2+置换为Co2+。
(2)物理修饰:通过物理方法,不改变酶的组成单位及基团,只使酶分子的空间构象发生改变(副键变化或重排),而改变酶的某些特性和功能。
①高压处理:酶活提高;最适条件改变;
②适当变性改变空间构象:稳定性适当提高

发表评论

:?: :razz: :sad: :evil: :!: :smile: :oops: :grin: :eek: :shock: :???: :cool: :lol: :mad: :twisted: :roll: :wink: :idea: :arrow: :neutral: :cry: :mrgreen: